Incorporación de la RT-PCR como metodología para el diagnóstico de la exocortis de los cítricos

Authors

  • María F. Palacios Estación Experimental Agroindustrial Obispo Colombres (EEAOC). Sección Centro de Saneamiento
  • J. Figueroa Estación Experimental Agroindustrial Obispo Colombres (EEAOC). Sección Fruticultura.

Keywords:

enfermedades transmisibles por injerto, detección molecular, viroides, certificación de material de propagación, viroids, graft transmissible diseases, molecular diagnosis, indexing program

Abstract

          El cultivo de los cítricos se ve afectado a nivel mundial por numerosas enfermedades transmisibles por injerto entre las cuales la exocortis de los cítricos, causada por Citrus exocortis viroid (CEVd), ocasiona importantes pérdidas económicas por disminución en la producción y hasta la muerte de las plantas afectadas. En este trabajo se buscó incorporar la técnica de RT-PCR como método cualitativo para la determinación de la presencia/ ausencia de este viroide. Se trabajó con cebadores específicos y se utilizó el diagnóstico biológico y la electroforesis secuencial en geles de poliacrilamida (sPAGE) como métodos de referencia. Las muestras analizadas se recolectaron de plantas cítricas de diferentes especies, cultivares e híbridos interespecíficos de quintas de las provincias de Tucumán, Salta y Jujuy (noroeste de Argentina). Se compararon los resultados obtenidos con las tres técnicas y se comprobó que el método de detección desarrollado es altamente reproducible, sensible y específico.

ABSTRACT

Incorporation of RT-PCR as a methodology for diagnosis of citrus exocortis viroid

          Citrus are affected by numerous graft-transmissible diseases. Among them, exocortis disease, caused by Citrus exocortis viroid (CEVd) reduces yield and can even cause the death of affected trees producing significant economic losses. The purpose of this work was to incorporate the RT-PCR technique as a qualitative presence/absence diagnostic method for this viroid. Specific primers were used and biological diagnosis and sequential polyacrylamide gel electrophoresis (sPAGE) were performed as reference methods. Samples analyzed were collected from citrus plants of different species and cultivars and interspecific hybrids from citrus orchards in Tucumán, Salta and Jujuy provinces (northwest Argentina). Results obtained with the three techniques were compared, verifying that the detection method developed is highly reproducible, sensitive and specific.

Author Biographies

María F. Palacios, Estación Experimental Agroindustrial Obispo Colombres (EEAOC). Sección Centro de Saneamiento

Lic. Biotec. Investigadora Asistente B. Sección Centro de Saneamiento, EEAOC.

J. Figueroa, Estación Experimental Agroindustrial Obispo Colombres (EEAOC). Sección Fruticultura.

Ing. Agr. Investigadora Asociado B. Sección Fruticultura, EEAOC.

References

Llanes-Alvarez, Y.; L. Hernández Rodríguez e I. Peña. 2017. La validación de métodos de diagnóstico como herramienta en los programas de vigilancia y manejo de fitopatógenos. CitriFrut 34(1) 46-54.

Duran-Vila, N.; J. A. Pina and N. L. Navarro. 1993. Improved indexing of citrus viroids. En: Proc. Conf. IOCV, 12, Riverside, CA, USA, pp. 201-211.

Garnsey, S. M; D. L. Zies; M. Irey; P. J. Sieburth; J. S. Semancik; L. Levy and M. E. Hilf. 2002. Practical Field Detection of Citrus Viroids in Florida by RTPCR. En: Proc. Conf. IOCV, 15 Riverside, CA, USA, pp. 219-229.

Ito, T.; H. Ieki and K. Ozaki. 2002a. Simultaneous detection of six citrus viroids and Apple stem grooving virus from citrus plants by multiplex reverse transcription polymerase chain reaction. Journal of Virological Methods 106: 235-239.

Ito , T.; H. Ieki; K. Ozaki; T. Iwanami; K. Nakahara; T. Hataya; T. Ito; M. Isaka and T. Kano. 2002b. Multiple citrus viroids in citrus from Japan and their ability to produce exocortis- like symptoms in citron. Phytopathology 92: 542-547.

Ministerio de Economía, Obras y Servicios Públicos, Secretaría de Agricultura, Ganadería, Pesca y Alimentación (MEOSP-SAGPyA). Resolución 149/98. 1998. Normas para la producción, comercialización e introducción de plantas cítricas de vivero y sus partes. MEOSP-SAGPyA, Buenos Aires. Argentina.

INASE 2003. Normativas. Resolución 98/03 Publicado en internet, disponible en https://www.argentina.gob.ar/normativa/nacional/resoluci%C3%B3n-98-2003-83350/texto (consultado agosto 2023).

INASE. 2023. Normativas. Resolución 458/2023. Publicado en internet, disponible en https://www.boletinoficial.gob.ar/detalleAviso/primera/291056/20230727 (consultado agosto 2023).

INASE. 2023. Normativas. Resolución 479/2023. Publicado en internet, disponible en https://www.boletinoficial.gob.ar/detalleAviso/primera/291916/20230810?busqueda=2 (consultado agosto 2023).

Olmos, A.; E. Bertolini y M. Cambra. 2008. Validación de métodos de detección y diagnóstico de patógenos y costes de la especificidad y sensibilidad. Boletín SEF (63): 7-11

Roistacher, C. N. 1991. Graft-transmissible diseases of citrus. Handbook for detection and diagnosis.FAO, Rome, Italy.

Semancik, J. S.; T. J. Morris; L. G. Weathers; G. F. Rordorf and D. R. Kearns. 1975. Physical properties of a minimal infectious RNA (viroid) associated with the exocortis disease. Virology 63: 160-167.

Wright, P. F.; E. Nilsson; E. M. A. Van Rooij; M. Lelenta and M. H. Jeggo. 1993. Standardization and validation of enzyme linked immunosorbent assay techniques for the detection of antibody in infectious disease diagnosis. Rev. Sci. Tech. Off. Int. Epiz. 12 (2): 435-450.

Published

04/01/2024

How to Cite

Palacios, M. F., & Figueroa, J. (2024). Incorporación de la RT-PCR como metodología para el diagnóstico de la exocortis de los cítricos. Revista Industrial Y Agrícola De Tucumán, 100(2), 53–56. Retrieved from https://publicaciones.eeaoc.gob.ar/index.php/riat/article/view/65

Issue

Section

Nota Técnica

Categories